Digitale Bildverarbeitung
Methoden
FRET mit Korrekturmethoden bestimmen
Für korrigierte FRET Messungen gibt es inzwischen zahlreiche in der Literatur beschriebene Verfahren. Die gebräuchlichsten Methoden wählen Sie aus einer Dropdown Liste aus. Diese Liste steht bereit, sowohl wenn Sie offline wie auch online messen. Für eine Offlineauswertung öffnen Sie eine zuvor gespeicherte Zeitserie von Mehrkanalfluoreszenzbildern.

Farbkodierte FRET Bilder
Farbkodierte Bilder nach den Korrekturverfahren von Youvan D.C. et al., 1997 (links) und Xia Z. et al., 2001 (rechts).
Bei einigen Verfahren ergeben sich sehr hohe FRET Werte im Untergrund und in den Randbereichen der Zellen. Diesen Effekt unterdrücken Sie, indem Sie eine Wichtungsfunktion nach Tsien R. (1990) verwenden.

Farbkodierte FRET Bilder mit und ohne Confidence Mapping
Farbkodierung nach Gordon et al (1998) ohne (links) und mit (rechts) angewendetem Confidence Mapping nach Tsien R.Y. (1990).
FRET können Sie auch weiterhin mit der Akzeptor-Bleich-Methode sowohl online wie auch offline bestimmen. Alternativ verwenden Sie eigene Formeln. Eine Reihe von Beispielen hierfür sind in der Gebrauchsanleitung und in der Hilfedatei enthalten. Um sie zu verwenden, kopieren Sie sie einfach in das Formelfeld.

FRET custom formula
Einfache Anwenderformel zur FRET Bestimmung mittels Donor Ratio.
Details
Physiologie
Broschüre (827 KB)
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