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| Ein Bild und seine Geschichte |
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Heute zeigen wir Ihnen die Zeitreihenaufnahme einer BY-2 Tabakzelle. Das Präparat wurde mit dem Rhodamin-B-markierten Trojanischen Peptoid EB899 behandelt. Die Zellen stellen ein Fusionsprotein aus Fimbrin und GFP her. Dadurch werden die Aktin-Mikrofilamente markiert.
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Das Bild wurde mit einem Plan Apochromat 63x/1.4 Objektiv und dem Zeiss CellObserverSD System aufgenommen. Die einzelnen Kanäle wurden dabei sequentiell erfasst. Die Anregung des Präparates erfolgte mittels Festkörper-Diodenlasern. Die GFP-Fluoreszenz wurde mit einer Wellenlänge von 488nm angeregt und mittels eines 520/35 Emissionsfilters detektiert. Die über den Emissionsfilter 617/73 detektierte Rhodaminfluoreszenz wurde mit einer Wellenlänge von 561nm angeregt.
Die Aufnahme erfolgte mit einer Interline CCD Kamera
AxioCam MRm im 2x2 Binning-Modus. Mittels ROI wurde der Aufnahmebereich auf die Zelle begrenzt. Für beide Kanäle wählte man als Belichtungszeit 50ms. Der resultierende Z-Stapel beinhaltet zehn mittels Piezo-Trieb aufgenommene Einzelebenen. Das AxioVision Modul Erweiterte Tiefenschärfe ermöglichte die Projektion der 3D Daten. Für das optimale Kontrastverhältnis wurde in den Displayeigenschaften unabhängig für beide Kanäle die Einstellung Min/Max aktiviert.
Die Arbeitsgruppen um Peter Nick vom Botanischen Institut und Stefan Bräse vom Institut für Organische Chemie widmen sich der Entwicklung Trojanischer Peptoide. Charakteristisch für diese Peptiode ist die Eigenschaft, Plasmamembranen schnell und unabhängig von Endozytose-Prozessen zu durchqueren. Die Arbeit ist Teil eines Projektes der Abteilung Nanobiologie des CFN (Zentrum für funktionelle Nanostrukturen). Dort wird untersucht, wie die Peptoide mit dem Zytoskelett der pflanzlichen Zelle interagieren. Zusätzlich erfolgt eine Analyse der räumlich zeitlichen Verteilung der Peptoide in der intakten Zelle. Beide Institute wie auch das CFN gehören der Universität Karlsruhe an.
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