Mit einer durchdachten Auswahl von Fluoreszenzmarkierungen, Filtern und Laser-Multitracking-Strategien erhalten Sie für die meisten Fluoreszenz-Imaging-Applikationen hervorragende Ergebnisse. Die Auswahl der experimentellen Parameter ist jedoch oft beschränkt. Bei der Untersuchung mehrfach markierter lebender Zellen ist es nicht immer möglich, fluoreszierende Sonden mit klar unterscheidbaren Spektren zu verwenden. Außerdem können durch intrinsische Autofluoreszenz Artefakte entstehen. Die Verwendung von Fixativen oder DNA-Transfektionsreagenzien kann die Autofluoreszenz oft bis an einen Punkt verstärken, an dem diese dann stärker ist als das Signal Ihres Spektralbildes. Zur Vermeidung dieser Art von Problemen verwenden Sie Spectral Imaging verbunden mit Linear Unmixing. So trennen Sie die fluoreszierenden Signale und lösen den räumlichen Beitrag jedes Fluorophors klarer auf. Diese Spectral Imaging-Technik wird oft auch als Emission Fingerprinting bezeichnet.
Mit Spectral Imaging verbinden Sie die beiden bewährten Technologien Spektroskopie und Imaging. Mit diesem Ansatz nehmen Sie Lambda-Stapel auf, die als Sammlungen von Bildern betrachtet werden können, von denen jedes über einen engen Wellenlängenbereich gemessen wird. Außergewöhnlich für seine Preisklasse - das Laser Scanning Mikroskop LSM 700 von Carl Zeiss erlaubt - die sequenzielle Aufnahme von Lambda-Stapeln dank der Implementierung eines VDS-Beamsplitters. Mit LSM 710 und LSM 780 erhalten Sie durch eine lineare Anordnung der Detektionskanäle sogar ein Spektralbild mit mehreren parallelen Emissionsbändern. Mit dem innovativen Detektor QUASAR können bis zu 34 Kanäle ausgelesen werden. So nehmen Sie mit einem einzigen Scan einen ganzen Lambda-Stapel auf und minimieren so die Phototoxizität. Außerdemwerden Ihnen erweiterte Verarbeitungstechniken durchdie hervorragende Rauschunterdrückungermöglicht. Die in jedem Kanal enthaltenen Informationen werden für weitere Analysen gespeichert.
Mit Linear Unmixing trennen Sie die Summe der spektralen Informationen Ihrer biologischen Probe auf in einzelne Bilder für jedes Fluorophor. Dazu verwenden Sie einen Algorithmus, der den spektralen Inhalt jedes Pixels Ihres Lambda-Stapels mit möglichen Summenkombinationen der bekannten Spektra der Fluorophormoleküle Ihrer Probe vergleicht. Die digitale ZEN Imaging Suite enthält eine Palette spezieller Softwareprogramme für Verarbeitung, Interpretation und Ergebnispräsentation.
Mit Spectral Imaging und Linear Unmixing lösen Sie Probleme in den Bereichen spektrale Karotypisierung, Immunofluoreszenz, Live Cell Imaging, Arzneimittelforschung und Gewebepathologie. Detektieren Sie eine breite Vielfalt von absorbierenden Farbstoffen und Fluorophoren und differenzieren Sie zwischen ihnen - auch bei einer signifikanten spektralen Überlappung. Dies ist besonders nützlich für die Quantifizierung der komplexen Signale in FRET-Untersuchungen. Autofluoreszenz kann als separates Fluorophor behandelt werden, das aus Ihrem interessierenden Signal getrennt wird.