Multitracking

Keine Chance für Crosstalk

Das Problem

Beim Arbeiten mit Proben, die mit mehreren Fluoreszenzfarbstoffen markiert sind (z. B. DAPI, FITC und Rhodamin), ist es schwierig, die Emissionssignale der einzelnen Fluoreszenzen voneinander zu trennen, um die richtige Information für jeden Kanal zu bekommen.

Die Lösung

Mit dem digitalen Signalprozessor (DSP) ist LSM 710 in der Lage, die Einstellungen für Laser und Detektoren (einen Track) sehr schnell zu wechseln. So kann eine Zeile mit den Einstellungen für den ersten Farbstoff gescannt werden, die nächste mit den Einstellungen für den zweiten Farbstoff und so weiter. Keine gleichzeitige Detektion, keinerlei Crosstalk

Flexible Definition

Maximal vier Tracks können definiert werden, jeder von ihnen mit unterschiedlichen Einstellungen für Laser und maximal vier Kanälen Ein Kanal kann dabei einem beliebigen Detektor oder dem Signalverhältnis zweier anderer Kanäle entsprechen. Alle während eines Multitracking-Scans aufgenommenen und berechneten Kanäle können während der Aufnahme einzeln und in der Überlagerung dargestellt werden.

Exakte Signalrelation

Höhere Aufnahmegeschwindigkeiten und exakte Positionierung der Signale zueinander verglichen mit sequentiellem Imaging.

Schneller mit DDS

Signalaufzeichnung bei allen Bewegungsrichtungen des Scanners (Dual Direction Scan, DDS) verdoppelt die Geschwindigkeit der Bildaufnahme. Mit jeder Änderung der Bewegungsrichtung des Scanners wechseln die Track-Einstellungen zum nächsten Track.

Kombinierte Funktionalität

Korrekte Schätzung: Multitracking lässt sich auch mit dem Scanning echter ROI kombinieren.

Hirnschnitt

Hirnschnitt, Nervenfasern (FITC), Zellkerne (Propidiumiodid).

Mit freundlicher Genehmigung von Dr. Schild, Abt. Molekulare Neurophysiologie, Universität Göttingen.

Die simultane Aufnahme beider Kanäle mit hoher Laserintensität führt zu starkem Durchbluten des FITC-Signals in den anderen Kanal (Crosstalk). Aufnahme desselben Präparates mit gleicher Laserintensität, aber mit Multitracking: Die Kanäle sind perfekt getrennt, es gibt keinerlei Crosstalk.

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